12662/12663質(zhì)粒純化試劑盒

12662/12663質(zhì)粒純化試劑盒

Performance

HiSpeed Plasmid Kits提供QIAfilter Cartridges、HiSpeed Tips和QIAprecipitator模塊，用于快速、大規(guī)模的制備質(zhì)粒，無(wú)需真空底座。針筒規(guī)格的QIAfilter和QIAprecipitator模塊取代了傳統(tǒng)陰離子交換過(guò)程中的離心操作，質(zhì)粒純化更加方便、快捷?？蓮?50–250 ml或50 µl – 150 ml的培養(yǎng)體積中純化多至750 µg（Maxi）、或200 µg（Midi）的高拷貝質(zhì)粒DNA（培養(yǎng)體積取決于質(zhì)?？截悢?shù)、插入片段大小、宿主菌和培養(yǎng)基）。HiSpeed Tip支持高流速，確保更快地完成DNA結(jié)合、洗滌和洗脫。

此外，HiSpeed tips中新型的陰離子交換樹(shù)脂**用于核酸的純化。其*的分離特性使得到的DNA的純度相當(dāng)于兩次氯化銫梯度離心處理得到的純度。

Principle

QIAfilter Cartridges（參見(jiàn)"QIAfilter Cartridge"）是一種特制的過(guò)濾器，于取代細(xì)菌細(xì)胞堿裂解之后的離心步驟。QIAfilter Cartridges可去除SDS沉淀，只需很短的離心時(shí)間即可澄清細(xì)菌裂解液。預(yù)裝的HiSpeed tips依靠重力流運(yùn)行，確保不會(huì)流干，減少了質(zhì)粒制備的手工操作時(shí)間。

*的QIAprecipitator模塊（參見(jiàn)"QIAprecipitator module"）取代了***沉淀后傳統(tǒng)的離心法純化DNA。***混合液流過(guò)QIAprecipitator的時(shí)候DNA會(huì)結(jié)合上去，然后用TE緩沖液或水將DNA從QIAprecipitator洗脫下來(lái)。這一*的模塊降低了離心后轉(zhuǎn)移上清液過(guò)程丟失DNA的風(fēng)險(xiǎn)。

Procedure

經(jīng)中和的細(xì)菌裂解液放入QIAfilter Cartridge中，幾秒內(nèi)過(guò)濾澄清。濾出液放至HiSpeed tip進(jìn)行質(zhì)粒DNA 純化（參見(jiàn)"QIAGEN Plasmid Kit procedures"）。 洗脫所得DNA與異丙醇混合并用注射器裝入QIAprecipitator中。經(jīng)濃縮和脫鹽后，直接從QIAprecipitator上用TE緩沖液或水洗脫DNA。

Applications

HiSpeed Plasmid Kits純化得到超純轉(zhuǎn)染級(jí)純DNA，適合于多種應(yīng)用，包括：克隆、測(cè)序、轉(zhuǎn)染和質(zhì)粒介導(dǎo)的基因沉默等。